海産二枚貝類の人為催熟のための内分泌調節メカニズムの解明とその応用

代表機関：東北大学

2014/04/01 - 2015/03/31

女川湾およびその他実験海域

その他

二枚貝類の配偶子形成を上位で支配する神経ペプチドや内分泌関連遺伝子を種々の海産二枚貝類で同定し、内因性のホルモンよって誘導される生殖関連遺伝子群の同定を試みた。具体的には遺伝子クローニングや次世代シーケンサーによる網羅的な解析、さらには公開されているトランスクリプトームリソースを用いた解析を実施した。また神経ペプチドによる人為催熟に向けた、合成ペプチドのin vivo投与も行うことで配偶子形成に及ぼす効果の検討を行った。一方、海産二枚貝類の配偶子放出を抑制的に支配する神経タンパクの構造機能を明らかにし、卵や精子における産卵誘発ホルモン（セロトニン）との関係と作用機序を検討するため、タンパク質発現系を用いた融合タンパク質の作製を試みた。

前年に海産二枚貝類の生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン（GnRH）遺伝子を、ホタテガイ、マガキ、イガイ、ウバガイ、マシジミにおいて単離したが、本年はさらにアサリ、ハイガイのGnRH前駆体遺伝子の単離に成功し二枚貝に共通したペプチド領域が推定された。またホタテガイの成熟過程の精巣におけるmRNAを次世代シーケンサーによって網羅的に解析し、GnRHの支配下にあると推定されるステロイドホルモン生合成酵素遺伝子について、本年は実際に遺伝子クローニングを行い全長cDNA配列を獲得した。また前年に同定した2種類のpyGnRHペプチドを合成し、それぞれをホタテガイにin vivo投与をおこなった。その結果、精巣発達の促進と卵巣における卵母細胞の成長遅滞を示唆する結果が得られ、人工催熟と性統御技術開発に利用可能な成果が得られた。 また、海産二枚貝類の配偶子放出を抑制的に支配する卵成熟休止因子（OMAF）の機能解析のための組換えOMAFタンパク質の作製を、新たなタンパク質発現系を用いて現在進行中であるがいまだ安定生産には至っていない。

FY2014 海産二枚貝類の人為催熟のための内分泌調節メカニズムの解明とその応用